藤黄溶栓酶对高尿酸血症肾功能损伤保护作用的研究

肾功能损伤是高尿酸血症(HUA)最常见的临床并发症之一，即体内产生过多的血尿酸或肾脏排泄的尿酸减少，尿酸盐达到过饱和状态时沉积于肾间质和输尿管，从而引起肾脏病变。HUA肾功能损伤的主要病理改变是慢性肾间质和肾小管病变，伴有局部炎症反应。近年来，HUA患者肾功能损伤的发生率呈上升趋势，男性患者多于女性患者，且发病隐匿，早期无明显临床症状。临床常用别嘌醇、非布司他、苯溴马隆，通过抑制尿酸生成、促进尿酸排泄来改善尿酸代谢，但对复杂肾功能损伤尚无确切疗效。糖尿病、HUA等代谢性疾病是中医药防治的优势疾病，中医药和少数民族医学对其相关并发症具有较好的临床治疗优势。藤茶又称草莓茶、芦笋茶、客家白茶，是以藤茶嫩枝嫩叶为原料加工而成。-马兹。)具有清热解毒、活血通络的功效。主要分布在四川、贵州、湖南、湖北、广西等少数民族地区，药食同源。藤茶含有黄酮类、多糖、酚类、氨基酸等活性成分。最丰富的黄酮类化合物有二氢杨梅素、藤茶、槲皮素、杨梅素等。其中，二氢杨梅素的质量分数为35%，被认为是藤茶发挥保健作用的重要药材基础。现代药理研究表明，藤茶及其总黄酮具有抗氧化、降血压、调节血脂、抗动脉粥样硬化、保护心血管、抗肝癌等药理作用。前期，课题组通过对民族常用藤茶的地区进行大量的走访和临床实践反馈，发现藤茶作为药食同源的植物，在很多少数民族地区可以治疗痛风和慢性肾炎，但对其治疗HUA肾功能不全的作用机制研究较少。因此，本研究利用分子对接技术合成了显齿蛇葡萄总黄酮中具有代表性的活性成分，并对药物成分与尿酸产生和排泄相关的蛋白质靶标之间的相互作用进行了深入探讨。建立腺嘌呤联合乙胺丁醇诱导的HUA大鼠肾功能损伤模型，并对模型进行验证，系统探讨藤茶总黄酮提取物对HUA肾功能损伤的保护作用，为少数民族地区药食两用资源藤茶的进一步保健开发提供科学依据。近年来，由于饮食习惯和生活条件的改变，人们大量食用嘌呤含量高的食物，HUA患病率逐年上升，成为仅次于糖尿病的“第四高”，严重危害人类健康。肾功能损伤是HUA最常见的临床并发症之一。尿酸是嘌呤代谢的最终产物。尿酸生成与排泄的失衡是直接诱发HUA肾功能损伤的主要原因。维持正常的血尿酸水平对预防肾脏疾病的发生和发展具有重要的临床意义。藤茶作为多民族地区的药食保健资源，活性成分丰富，具有很大的开发价值。XOD和ADA是尿酸生成途径中的重要靶蛋白，在嘌呤分解代谢中起重要作用。抑制它们的活性可以有效控制血尿酸水平。尿酸转运蛋白URAT1、GLUT9和ABCG2是肾小管上皮细胞上的尿酸转运蛋白，参与尿酸盐的分泌和重吸收，是肾脏调节尿酸代谢的重要靶点。本研究通过分子对接模拟了AGTF的主要活性成分和HUA的5个潜在治疗靶点(URAT1、GLUT9、ABCG2、XOD和ADA)。结果表明，AGTF的主要活性成分二氢杨梅素、杨梅素、槲皮素和显齿蛇葡萄素与疾病相关靶点具有良好的结合活性，表明AGTF具有良好的抗肿瘤活性

其中，显齿蛇葡萄对接得分最高，二氢杨梅素次之。目前对显齿蛇葡萄的药理活性研究较少。而二氢杨梅素，由于尿酸不能作为AGTF的主要活性成分，不仅具有良好的降血糖、调节血脂、抑菌、抗炎、镇痛、抗氧化、抗肿瘤、保肝、免疫调节等药理活性，还能显著降低小鼠血清中的尿酸水平，具有保护作用。对接结果还显示，别嘌醇可以自由结合5种受体蛋白，其中与XOD靶点的结合能最小，说明别嘌醇与XOD的相互作用最强，这与报道中其可以抑制XOD、降低尿酸生成的说法一致。与别嘌醇的对接结果相比，AGTF的主要活性成分比别嘌醇更容易与5种受体蛋白相互作用。提示AGTF在抗HUA及其肾功能损伤方面具有潜在的临床应用价值。AGTF可能通过二氢杨梅素、杨梅素、槲皮素、显齿蛇葡萄等活性成分作用于URAT1、GLUT9、ABCG2、ADA、XOD等靶点，在HUA治疗肾功能损伤中发挥药效作用，体现了中药多成分、多靶点的特点。基于分子对接的结果，本研究利用腺嘌呤和乙胺丁醇建立了HUA肾功能损伤大鼠模型，并通过体内实验进一步探讨了AGTF对HUA肾功能损伤的保护作用及其机制。结果表明，AGTF组大鼠XOD、ADA活性及血清尿酸、肌酐、尿素氮水平明显降低，肾脏病理改变明显减轻，说明AGTF对降低血尿酸水平、改善尿酸代谢、减轻高尿酸血症沉积对肾脏组织的损伤有良好的作用，其机制可能与调节尿酸盐转运体URAT1、GLUT9、ABCG2的表达，抑制炎症因子TNF-a、IL-1、IL-1有关。一方面，AGTF能明显抑制尿酸盐转运体URAT1和GLUT9的表达，阻碍尿酸盐在肾近曲小管的重吸收；另一方面，通过上调ABCG2转运蛋白的表达，增强尿酸盐在肾脏近曲小管侧膜的转运速率，促进尿酸盐在肾脏的排泄，协同降低尿酸水平，减少尿酸盐在肾小管的沉积，从而减轻肾功能的损害。尿酸盐在肾脏过度蓄积，可刺激肾小管上皮细胞，促进局部炎症反应，导致肾间质纤维化。AGTF能显著降低大鼠肾脏TNF-a、IL-1、IL-6和TGF-的蛋白表达，抑制炎症反应，保护肾功能，延缓肾间质纤维化。综上所述，本研究通过分子对接技术结合体内实验发现，AGFT不仅可以调节尿酸盐转运体URAT1、GLT9和ABCG2的表达，还可以降低大鼠血清中尿酸代谢相关指标的水平，有效改善HUA和肾脏的病理反应，同时抑制肾脏的炎症反应。

挥对HUA肾功能损伤的保护作用。与分子对接结果一致，AGTF能够直接作用于XOD、ADA、URAT1、GLUT9、ABCG2关键靶蛋白，从而发挥其治疗作用，表明分子对接结果具有可靠性和合理性。曾运雄博士介绍：痛风是一种由于机体嘌呤代谢紊乱引发的尿酸过多或者是尿酸排泄减少，并在机体内蓄积沉淀所导致的一组代谢性疾病。随着人们生活水平的提高及饮食结构的变化，痛风发病率呈逐年上升的趋势。据保守估计，目前我国有高尿酸血症患者1. 2亿，患者人口接近总人口数的10%,其中北上广深等重点城市医院抗痛风药销售额增长率几乎每年都保持在30%以上。尿酸内源性产生约占80%,外源性产生约占20%.尿酸主要通过肾脏的排泄，以维持人体尿酸水平的正常。痛风患者血尿酸水平越高，其糖尿病、心衰、高血压、心梗以及肥胖的发生率也越高，与高血压、高脂血症、动脉粥样硬化、肥胖和胰岛素抵抗等疾病的发生密切相关，是当今世界尤其是中老年男性的常见病，已成为威胁人类健康的严重代谢性疾病。中医认为痛风是风湿顽痹证，主要是外感风寒湿邪，久病邪气痹阻经络，气血津液运行受阻。多因饮食工失宜，过食肥甘厚味，湿浊内蕴，日久化热所致。痛风的发病机制，主要与湿浊、痰淤、热毒有关。对于痛风的治疗目前多采用西药为主，常用的有秋水仙碱，非甾体类抗炎镇痛药，肾上腺糖皮质激素和丙磺舒等，此类西药虽然见效快，但大多治标不本，停药后病痛很容易又复发，而且此类药物往往毒副作用比较大，除可引起胃肠道反应外，长期服用还可能导致骨髓抑制、肝细胞损害、精神抑郁、上行性麻痹、呼吸抑制等等副作用。

曾运雄博士介绍：藤茶溶栓酶通过调节人体微循环，疏通因血栓堵塞的毛细血管，恢复关节细胞营养供给，然后补充藤茶黄酮、明日叶、拐枣、针叶樱桃、印加果、南非叶、白簕等补益性食材，中和机体过多酸性物质，抑制嘌呤氧化酶活性，减少尿酸的产生，调节机体酸碱平衡，促进尿酸排泄，降低血清尿酸水平，缓解尿酸累计所致的三高、心衰、心梗、肥胖以及结石等症状;同时根据中医病因辩证理论，复配印加果、红甜菜、白簕、南非叶，焕发机体各项生理机能，从根本上调节身体的尿酸代谢水平，其中南非叶活血散瘀、镇静止痛;明日叶、白簕、舒筋活络、祛风除湿，通行十二经络，治疗风寒湿痹，半身不遂;茯苓渗湿通降;土涩通淋利水;藤茶解毒消炎、消食健胃。诸味原料通过君臣佐使的配伍理论，共同发挥预防和治疗高尿酸血症及痛风的作用。

曾运雄新加坡国立大学医学和分子生物学双博士。

2009年在新加坡生物工程研究院开始从事微量元素、人体酶系统与人类疾病的关系研究;

2010年谷氨酸脱羧酶研究;

2012在淡马锡生命科学院开始涉及P53基因的表达与免疫方面的应用研究;

2013年从事超抗原溶酶基因水蛭素这一新兴领域的研究方向、开发和应用。

2014年从事超抗原白簕多糖在卵巢癌和食管癌抗肿瘤药物的领域开发和应用。

2015年从事心脑血管疾病防治，新药明日叶查尔酮研发;

2016从事生物医药产品研发方面主要开展了超抗原、心脑血管疾病的日常防治产品的应用和研究;

2017年从事超抗原溶酶基因蒲公英赛醇用于治疗肺纤维化有效抑制人胚肺成纤维细胞株MRC-5的增殖，还可以有效促进人胚肺成纤维细胞株MRC-5的凋亡领域开发和应用。

2018年从事超抗原溶酶基因南非叶在心脑血管疾病和护肝产品领域开发和应用。

2019年在抗阿尔茨海默病(AD)和抗心脑血管和癌症等重大疾病方面，取得了具有影响的创新性成果。

2020年从事超抗原溶酶基因改善睡眠的功能性溶栓酶产品领域开发和应用。

【来源：咸宁网】